厭氧培養工作站的目的是指把微生物置于與分子態氧隔絕狀態下所進行的培養,適用于兼性厭氧菌和專性厭氧菌。 由于目的不同而有不同的培養方法,可分為以下幾大類:
(1)與空氣隔絕或盡量少接觸空氣的培養法:在三角瓶瓶頸以下裝滿液體培養基,通過煮沸把溶解的空氣趕出后,立即冷卻進行細菌接種。由于發酵而產生H2和CO2時,就可進一步確認是厭氧細菌。
另外,把瓊脂培養基加入普通試管約10厘米高度進行穿刺培養,或移植于液體培養基和固體斜面培養基上以后,再加一層液體石臘或礦物油,用這些方法可防止與空氣接觸。
(2)除掉空氣的方法:把微生物裝入耐壓容器中進行真空培養,或充滿二氧化碳、氫氣、氮氣、氬氣等。這些氣體可把事先混入的微量氧氣除掉。在氫存在時,可用置換后飛濺火花等方法來除掉殘存的氧氣
(3)去氧的方法:使用堿性鄰苯 三酚(pyrogallol) 、黃磷、金屬鉻和稀硫酸進行化學除氧,或使用好氧細菌及發芽的種子,使通過呼吸而消耗掉氧氣。
(4)在培養基中加入還原劑(如0.1%的巰基乙酸鈉鹽,0.01%的硫化鈉等)。以上各種方法進行適當組合就能進一步確認厭氧細菌。為了確定厭氧性,可在堿性條件下加入葡萄糖并加熱,與配制的還原型次甲藍(美藍)溶液一起加入,保持脫色狀態即可。